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  • 固相èƒå–æ“作的基本步éª?

    克莱克特 2019/7/17

    固相èƒå–是一个包括液相和固相的物ç†èƒå–过½E‹ï¼Œæ˜¯ä¸€¿U柱色谱分离˜q‡ç¨‹åQŒå…¶åˆ†ç¦»æœºç†ã€å›ºå®šç›¸å’Œæº¶å‰‚的选择½{‰æ–¹é¢ä¸Žé«˜æ•ˆæ¶²ç›¸è‰²è°±æœ‰è®¸å¤šç›¸ä¼ég¹‹å¤„。固相èƒå–主è¦åº”用于试样的预处ç†åQŒæœ¬æ–‡å…‹èŽ±å…‹ç‰¹å°±æ¥è®²è®²å›ºç›¸èƒå–æ“作的基本步骤ã€?/span>

    固相èƒå–一般有四个基本步骤åQšå›ºå®šç›¸‹zÕdŒ–åQŒæ ·å“上柱,淋洗和分æžç‰©‹z—脱ã€?/span>

    åQ?åQ‰æ´»åŒ–ã€‚æ´»åŒ–çš„ç›®çš„æ˜¯åˆ›é€ ä¸€ä¸ªä¸Žæ ·å“æº¶å‰‚ç›¸å®¹çš„çŽ¯å¢ƒåÆˆé™¤åŽ»æŸ±å†…æ‰€æœ‰æ‚质。通常需è¦ä¸¤¿U溶剂æ¥å®Œæˆä¸Šè¿°ä»ÕdŠ¡åQŒç¬¬ä¸€ä¸ªæº¶å‰‚用于净化固定相åQŒå¦ä¸€ä¸ªæº¶å‰‚用于å¾ç«‹ä¸€ä¸ªåˆé€‚的固定相环境ä‹Éæ ·å“分æžç‰©å¾—到释攄¡š„ä¿ç•™ã€?/span>

    åQ?åQ‰ä¸Šæ —÷€‚å°†æ¶²æ€æˆ–溶解åŽçš„å›ºæ€æ ·å“倒入‹zÕdŒ–åŽçš„固定相èƒå–å°æŸ±ï¼Œç„¶åŽåˆ©ç”¨æŠ½çœŸ½Iºã€åŠ åŽ‹æˆ–¼›Õd¿ƒçš„æ–¹æ³•ä‹É样哘q›å…¥å›ºå®šç›¸ã€‚äØ“äº†ä¿ç•™åˆ†æžç‰©åQŒæº¶è§£æ ·å“的溶剂必须较弱。如果溶剂太强,分æžç‰©å°†ä¸è¢«ä¿ç•™åQŒç»“果回收率ž®†ä¼šå¾ˆä½ŽåQŒè¿™ä¸€çŽ°è±¡å«åš½I¿æ¼ã€?/span>

    åQ?åQ‰æ·‹‹z—。选择åˆé€‚强度的溶剂åQŒå°†òq²æ‰°¾l„分‹z—脱下æ¥åQŒåŒæ—¶ä¿æŒåˆ†æžç‰©ä»ç•™åœ¨æŸ±ä¸Šã€‚æ·‹‹z—溶剂的‹z—脱强度å¯ç•¥å¼ÞZºŽæˆ–等于上æ ähº¶å‰‚,但ä¸èƒ½å¼ºåˆ°å¯ä»¥æ´—è„׃“Q何一个分æžç‰©çš„程度。淋‹z—步骤也能确ä¿å…¨éƒ¨æ ·å“ä¸Žå›ºå®šç›¸æŽ¥è§¦ï¼Œå› äØ“ä¸Šæ ·æ—‰™ƒ¨åˆ†æ ·å“溶剂的ž®æ¶²æ»´å¯èƒ½è¿˜æ²‘Öœ¨½Ž¡å£ä¸Šï¼Œæ·‹æ´—æº¶å‰‚å¯æŠŠæ¶²æ»´å…¨éƒ¨‹z—入固定相ã€?/span>

    åQ?åQ‰æ´—脱。淋‹z—过åŽï¼Œž®†åˆ†æžç‰©ä»Žå›ºå®šç›¸ä¸Šæ´—脱,‹z—脱溶剂用é‡ä¸€èˆ¬æ˜¯0.5~0.8ml/100mg固定相,而溶剂必™å»è¿›è¡Œè®¤çœŸé€‰æ‹©ã€‚溶剂太强,一些更å¼ÞZ¿ç•™çš„ä¸å¿…è¦ç»„分将被洗出æ¥åQ›æº¶å‰‚太弱,ž®±éœ€è¦æ›´å¤šçš„‹z—脱液楋z—出分æžç‰©ï¼Œ˜q™æ ·å›ºç›¸èƒå–æŸÞqš„‹¹“羃功效ž®×ƒ¼šå‰Šå¼±ã€‚收集è“væ¥çš„‹z—脱液å¯ä»¥ç›´æŽ¥å‘色谱æŸÞp¿›æ øP¼Œä¹Ÿå¯ä»¥æŠŠå®ƒæµ“¾~©åŽæº¶äºŽå¦ä¸€æº¶å‰‚中进样和˜q›ä¸€æ­¥å‡€åŒ–ã€?/span>

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